產(chǎn)品名稱:組織固定液(10% NBF)
品牌: PERFEMIKER
固定的目的在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu),固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對(duì)自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng),固定劑通過(guò)凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使酶失活,固定劑對(duì)細(xì)胞核細(xì)胞外成分發(fā)生物理改變,固定液主要分為醛類(lèi)固定液、汞類(lèi)固定液、醇類(lèi)固定液、氧化劑類(lèi)固定液、苦味酸鹽類(lèi)固定液等,較為常用的是醛類(lèi)中的福爾馬林、醇類(lèi)中的乙醇。
一、科研應(yīng)用領(lǐng)域
組織形態(tài)與細(xì)胞結(jié)構(gòu)的保存
10%中性福爾馬林固定液(NBF)通過(guò)甲醛與蛋白質(zhì)交聯(lián)形成穩(wěn)定的亞甲基橋,有效保存細(xì)胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),防止自溶和微生物降解。其pH接近中性(6-8),可減少酸性環(huán)境對(duì)組織抗原的破壞,適用于常規(guī)病理學(xué)分析、光鏡觀察及超微結(jié)構(gòu)研究。
免疫組織化學(xué)(IHC)與分子病理學(xué)研究
NBF在固定過(guò)程中能較好地保留組織抗原性,為后續(xù)抗體標(biāo)記、熒光染色等提供基礎(chǔ),尤其適用于需要長(zhǎng)期保存樣本的免疫組化實(shí)驗(yàn)。其磷酸鹽緩沖體系可減少核酸降解,支持分子病理學(xué)中的DNA/RNA提取及測(cè)序分析。
標(biāo)準(zhǔn)化病理學(xué)流程
作為國(guó)際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)固定劑,10% NBF被廣泛用于醫(yī)院病理科和科研機(jī)構(gòu)的活檢組織處理,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和可比性。其固定時(shí)間與組織厚度相關(guān)(1-4小時(shí)/毫米),適用于從軟組織(如肝臟)到硬組織(如骨骼)的多樣化樣本。
教學(xué)與科研樣本庫(kù)建設(shè)
固定后的組織可在NBF或70%乙醇中長(zhǎng)期保存,便于建立標(biāo)準(zhǔn)化的生物樣本庫(kù),用于疾病機(jī)制研究、藥物篩選及教學(xué)示范。
與其他固定劑的對(duì)比研究
在科研中,NBF常與多聚甲醛、乙醇等固定液進(jìn)行對(duì)比,評(píng)估其對(duì)不同組織類(lèi)型(如腫瘤、神經(jīng)組織)的固定效果,探索優(yōu)化固定條件的策略。
二、研究目標(biāo)與方向
抗原保存技術(shù)的優(yōu)化
研究如何通過(guò)調(diào)整固定時(shí)間、溫度或添加保護(hù)劑(如聚乙烯醇)減少甲醛對(duì)表位的影響,提升免疫組化檢測(cè)的靈敏度和特異性。
環(huán)保型固定液的開(kāi)發(fā)
針對(duì)甲醛的毒性和環(huán)境污染問(wèn)題,探索無(wú)甲醛替代品(如環(huán)保Ⅰ/Ⅱ型固定液)的研發(fā),同時(shí)保持或超越NBF的固定效果。
固定過(guò)程的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)與標(biāo)準(zhǔn)化
開(kāi)發(fā)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)固定液滲透速率(約1毫米/小時(shí))和交聯(lián)程度的技術(shù),建立基于組織類(lèi)型和厚度的智能固定方案。
多組學(xué)整合研究
結(jié)合代謝組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),分析NBF固定對(duì)組織內(nèi)小分子代謝物、脂質(zhì)及磷酸化修飾的影響,優(yōu)化適用于多組學(xué)分析的固定條件。
臨床轉(zhuǎn)化與個(gè)性化醫(yī)療應(yīng)用
研究NBF固定對(duì)腫瘤標(biāo)志物、基因突變檢測(cè)(如EGFR、KRAS)的影響,推動(dòng)其在精準(zhǔn)醫(yī)療和個(gè)體化治療方案制定中的應(yīng)用。
操作規(guī)范與研究挑戰(zhàn)
操作要點(diǎn):
固定液與組織體積比需≥10:1,確保充分滲透;大樣本需多次更換固定液。
避免高溫(加速交聯(lián)可能破壞抗原)和過(guò)度延長(zhǎng)固定時(shí)間(導(dǎo)致組織硬化)。
安全與環(huán)保:
甲醛具有刺激性和致癌性,需在通風(fēng)櫥中操作并穿戴防護(hù)裝備。
含甲醛廢液需專門(mén)處理,推動(dòng)實(shí)驗(yàn)室向環(huán)保型固定劑過(guò)渡。
技術(shù)瓶頸:
交聯(lián)反應(yīng)可能掩蓋部分抗原表位,需開(kāi)發(fā)解交聯(lián)技術(shù)或新型抗體。
甲醛固定對(duì)某些分子(如miRNA)的保存效果仍需改進(jìn)。
總結(jié)與展望
10% NBF作為科研領(lǐng)域的“金標(biāo)準(zhǔn)”固定劑,其核心價(jià)值在于平衡形態(tài)保存與生物分子完整性。未來(lái)研究將聚焦于綠色替代品開(kāi)發(fā)、智能化固定監(jiān)測(cè)系統(tǒng)及多組學(xué)兼容性優(yōu)化,以滿足精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的更高需求。隨著環(huán)保法規(guī)的收緊和技術(shù)進(jìn)步,無(wú)甲醛固定液或?qū)⒊蔀橄乱淮芯繜狳c(diǎn)。